Quito.- Un grupo de investigadores de Ecuador, México y Polonia desarrollaron una prueba de PCR multiplex (m-PCR) capaz que identificar en una sola reacción las cinco especies de algas Prototheca que son patógenas para humanos y animales, según anunció en un comunicado el ecuatoriano Instituto Nacional de Biodiversidad (Inabio).
Entre las cinco especies de algas Prototheca que puede identificar esta m-PCR están las tres asociadas con la infección en el ganado lechero (P. ciferrii, P. blaschkeae y P. bovis) y las dos especies asociadas con infecciones humanas (P. wickerhamii y P. cutis).
El proceso de identificación se logra a través de un sencillo procedimiento de pruebas PCR de punto final, seguido de la separación de los fragmentos amplificados utilizando un gel de agarosa.
Para ello, los investigadores han diseñado cebadores específicos para la detección de estas cinco especies, un método basado en secuencias de citocromo B y evaluado con cepas de referencia de cada una de las cinco especies de Prototheca.
La validez del método se confirmó mediante la identificación de 50 cepas aisladas de muestras de leche, y su especifidad se probó in silico (rama de la biología computacional cuyo objetivo es explorar y experimentar con procesos biológicos por medio de simulaciones hechas en computadora) y con ensayos experimentales de PCR.
Los exámenes consiguieron que los resultados no mostrasen reacciones cruzadas con otras especies de Prototheca, así como con bacterias, hongos, vacas, algas, animales o humanos.
«Mediante el uso de una m-PCR dirigida a estas especies patógenas clave, potencialmente se puede crear una herramienta rentable y fácil de usar para identificar rápidamente las infecciones más importantes causadas por Prototheca», apuntó el Inabio.
INFECCIONES DE DIFÍCIL DIAGNÓSTICO
El diagnóstico de estas infecciones puede ser un desafío, ya que los síntomas pueden ser similares a otras enfermedades y, a menudo, no se sospecha que el organismo sea la causa de la infección, por lo que puede confundirse con levadura o no detectarse en cultivo debido al lento crecimiento en el medio de cultivo.
Prototheca es un género de microalgas unicelulares sin clorofila, de vida libre que pertenece a la familia Chlorellaceae y que se pueden encontrar en el suelo y en ambientes acuosos.
En algunos casos, debido a la pérdida de actividad fotosintética y su adaptación al crecimiento heterótrofo (no produce su propio alimento) puede causar infecciones por prototecosis (infecciones causadas por algas del género Prototheca) tanto en animales como en humanos.
La mastitis bovina es una forma importante de prototecosis animal que puede afectar a todo el rebaño y causar pérdidas económicas significativas en la industria lechera.
La patogenicidad en humanos sólo se observa bajo ciertas condiciones, como un nivel de respuesta inmune del huésped debilitado o reducido, y es causada principalmente por P. wickerhamii y P. cutis.
Sin embargo, las especies asociadas con la infección en el ganado lechero también se han mencionado como causantes de infecciones en humanos.
En el desarrollo esta prueba m-PCR participaron los investigadores David Vasco-Julio, María Huilca-Ibarra, Yanua Ledesma, Gustavo Echeverria, Tomasz Jagielski, Salome Guerrero-Freire, Carlos Bastidas-Caldes y Jacobus H. de Waard.
Las instituciones involucradas en esta investigación fueron la Universidad de Las Américas (UDLA), de Ecuador; la Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), el Instituto Nacional de Salud Pública de Cuernavaca (México), la Universidad Central del Ecuador (UCE), BioGENA (Ecuador), la Universidad de Buenos Aires (UBA), la Universidad Internacional SEK, la Universidad de Varsovia (Polonia) y el Inabio.
